親水色譜柱是一種專門設計用于分離親水性和極性化合物的色譜柱。利用固定相上的親水性基團與樣品中的極性基團之間的相互作用,實現(xiàn)對極性化合物的有效分離。其工作原理基于親水作用和可能的離子交換作用。在分離過程中,水相固定相上的親水性基團與待分離物質(zhì)中的極性基團發(fā)生相互作用,從而實現(xiàn)物質(zhì)的分離和純化。
1、固定相
基質(zhì):常見的是硅膠,硅膠具有較大的比表面積和良好的機械強度,能為分離提供穩(wěn)定的支撐。此外,也有使用其他材料作為基質(zhì)的情況,如一些聚合物基質(zhì)等,不同的基質(zhì)適用于不同的分析需求。
鍵合相:這是親水色譜柱的關(guān)鍵部分,通過化學反應將具有親水基團的化合物鍵合到基質(zhì)表面。常見的親水基團有羥基、胺基、酰胺基等,這些基團可以與樣品分子中的極性基團發(fā)生相互作用,從而實現(xiàn)對樣品的分離。例如,TSKgel Amide-80是由乙二醇基團修飾的硅膠填料構(gòu)成,屬于親水基團鍵合硅膠色譜柱。
2、柱管
通常由不銹鋼等材質(zhì)制成,柱管的作用是固定和保護內(nèi)部的固定相,同時為流動相和樣品提供流通的通道。柱管需要具備一定的強度和耐腐蝕性,以承受流動相的壓力和避免被樣品及流動相腐蝕。
3、封端基團(可選)
有些親水色譜柱會有封端基團,其作用是減少固定相表面的殘留硅醇基等活性基團,降低與樣品分子的非特異性吸附,從而改善峰形,提高分離效果和選擇性。
4、連接部件
包括進樣口和出樣口等連接部件,用于將色譜柱與液相色譜系統(tǒng)的其他部分(如輸液泵、檢測器等)相連,確保流動相和樣品能夠順利地流入和流出色譜柱。