離子交換色譜柱(IEC)是高效液相色譜(HPLC)中的一種重要色譜柱,它基于離子交換原理,專門用于分離和純化帶電分子(離子)。
離子交換色譜柱的固定相是離子交換劑,它可以是天然的或合成的高分子聚合物,表面含有可以進(jìn)行可逆離子交換的離子交換基團(tuán)。當(dāng)樣品溶液通過色譜柱時(shí),樣品中的離子會(huì)與固定相上的離子交換基團(tuán)發(fā)生交換作用,根據(jù)離子與固定相之間親和力的不同,離子會(huì)被不同程度地保留在柱上。隨后,通過改變流動(dòng)相的組成或使用梯度洗脫,可以逐漸減少離子與固定相之間的相互作用,使離子逐個(gè)或一群一群地從柱上洗脫下來,從而實(shí)現(xiàn)離子的分離。
根據(jù)固定相所帶電荷的不同,離子交換色譜柱可以分為陽(yáng)離子交換柱和陰離子交換柱兩種:
陽(yáng)離子交換柱:固定相含有帶負(fù)電荷的離子交換基團(tuán)(如磺酸基-SO3-),能夠吸引并交換溶液中的陽(yáng)離子(如Na+、NH4+、K+等)。
陰離子交換柱:固定相含有帶正電荷的離子交換基團(tuán)(如季銨鹽-N+(CH3)3),能夠吸引并交換溶液中的陰離子(如Cl-、SO42-、PO43-等)。
在選擇離子交換色譜柱時(shí),需要考慮樣品的性質(zhì)、離子的種類以及分離的要求。同時(shí),還需要注意色譜柱的兼容性、pH穩(wěn)定性以及最大操作壓力等關(guān)鍵參數(shù)。